1. 分光光度法氨基酸检测:主要是利用氨基酸与衍生剂发生化学反应,产生蓝紫色化合物,该化合物在某一波长处有最大吸收峰,根据吸收值大小得到氨基酸含量。常用的衍生剂为茚三酮。
2. 毛细管电泳法氨基酸检测:根据分离原理的不同,可分为毛细管区带电泳、毛细管凝胶电泳、毛细管等电电泳、毛细管等速电泳以及胶束电动力学毛细管电泳。其中,毛细管区带电泳和胶束电动力学毛细管电泳可用于氨基酸检测。
3. 近红外光谱法氨基酸检测:利用有机化合物的含氢基团在特定波长区域跃迁,产生光谱的变化,结合统计学方法间接地实现氨基酸的定量检测。
4. 气相色谱法氨基酸检测:将氨基酸衍生化处理变为容易气化的物质,根据气态样品中各组分在流动相和固定相中的分配系数的不同,实现对氨基酸的定量分析。
5. 高效液相色谱法氨基酸检测:是最常用的一种氨基酸检测方法。由于大多数氨基酸本身没有紫外吸收和荧光反应,因此需要对样品进行衍生化处理将其转化为有紫外吸收和发射荧光的物质,衍生可分为柱前衍生和柱后衍生。
不同的氨基酸的羰基的吸收峰位置是不一样的。
有的形成酰胺基,在1690附近
有的形成酯基,在1725附近。
有的羰基因为附近其他集团影响,峰位有偏移,
总的来说,应该都在1670-1730之间。
双缩脲试剂:有无肽键,蛋白有,氨无,蛋白显紫
丁达尔现象:用红外线灯照射,检验是否胶体,蛋白液为胶体出现光亮通路,氨否
加热:蛋白质加热变性,变白,氨否
茚三酮:氨基酸溶液显蓝紫色,蛋白质否
氨基的吸收峰在3500—3300 为中等双峰
至于在3600附近有吸收峰的官能团还有羟基(醇或酚)
一般高波数一端为与氢原子相结合的官能团 比如O-H N-H C-H S-H等键的伸缩振动吸收带

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