黑木耳菌种（黑木耳菌种概述）

黑木耳生产上所用菌种的主要种型有几种？

黑木耳菌种同香菇一样，按培养基的原料性质分类主要有木屑菌种、木块菌种、颗粒菌种、木条菌种、液体菌种等，以木屑菌种为最常用。液体菌种因培养环境要求无菌程度高，菌种保存期短，使用期限制严格，目前专业性生产规模小，运输不便等原因，尚难于推广。

黑木耳菌种有哪些保藏方法？

（1）斜面低温保藏法

斜面低温保藏法是最常用的菌种保藏方法。将所要保藏的黑木耳菌种在无菌条件下移接到营养丰富的斜面培养基上，经培养，待菌丝刚长满斜面时，选择菌丝粗壮、菌落边缘整齐、表面无褐斑的试管，用硫酸纸包好，保藏于温度4℃左右的冰箱中。菌种保藏6个月左右移接1次，此法一般可保藏2～3年。

（2）石蜡保藏法

先将石蜡油盛于三角瓶中，塞好棉塞，经9.8×104帕蒸汽灭菌后，取出放在32～40℃恒温箱中，使石蜡油中水分挥发掉，直到石蜡油由混浊变为清澈透明为止。再将石蜡油在无菌条件下倒入黑木耳菌种斜面，液面要高出斜面顶部约1厘米，防止斜面水分蒸发掉，放在常温下保存。在5～30℃之间可保存4～8年。

黑木耳菌种制作的方法

黑木耳菌种制作的各个环节都应按照操作流程规范进行：

一、菌种配料

传统配方：木屑81%、麦麸15%、黄豆粉或豆饼粉2%、石膏1%、红糖1%。

雪梅配方：木屑80斤、麦麸5斤、豆粉或豆饼粉2筋、菇耳壮0.16斤，石膏1斤

先将锯末称好，再将麦麸或稻糠，黄豆粉或豆饼粉，石膏干拌拌均，再把菇耳壮溶解在5升水中，将溶解的菇耳壮营养液与麦麸，黄豆粉，石膏先干拌的混合物拌均，拌均后闷堆30分钟后，再与锯末掺和在一起干拌拌均，拌匀后加水翻3～4遍搅拌均匀，使含水量达～65%，用测水仪的指针扎入锯末，看表盘指针读数到65即可。用土法测，手紧握料，在手指间有水珠渗出稍滴水为宜。

二、装瓶

将拌好的料闷堆1～2小时后装瓶，用黑白铁制作能坐在葡萄糖注射液瓶子上的漏斗，将拌完的料用自制的6分盘圆钩将拌完的料装入瓶中。再用1厘米的木棍从瓶口中央到瓶底打个孔。再准备一盆清水将装好的葡萄糖注射液瓶子用手以45℃的角度把瓶口放入水盆中转一圈，这样就把瓶口沾的料涮干净了，再塞好棉塞。在生产过程中当天拌好的料必须当天装瓶当天灭菌。

三、灭菌

将装好的葡萄糖注射液瓶子或者菌袋放在常压或高压灭菌锅里灭菌，在15千克/平方厘米的压力下保持1.5～2小时，等压力降至零时，将锅盖打开三分之一，用锅内余热将瓶口及棉塞烘干，30分钟后将葡萄糖注射液瓶子趁热取出，立即放在接种箱内。若用常压灭菌灶灭菌，保持8～12小时，将锅盖打开1/2，用锅内余热将瓶口及棉塞烘干。20分钟后将葡萄糖注射液瓶子趁热取出，灭菌一定要彻底。

四、接种

黑木耳在接菌时一定要按无菌操作进行，提高成品率，灭菌后出锅降温至30℃以下的瓶可以接种，最佳接菌温度为25～30℃之间。目前，黑木耳的接菌方法很多，可根据自已具体情况和条件定，要注意，连续接种时间不要太长，以免箱内温度过高;一个试管一级雪梅菌种接葡萄糖注射液瓶10瓶，先将雪梅试管一级菌种在无菌台式酒精灯前拔下棉塞，再将试管里的一级菌种分成8等份，把每份移接到灭菌的葡萄糖注射液瓶子里，一定注意一级菌种不能贴在瓶壁上，立即塞上棉塞缩短接种时间不给杂菌侵入的机会。如果是用接种袋接种，每个试管接种五六个为宜。

五、养菌

在黑木耳菌丝培养全过程中，要创造使菌丝体健壮生长，又能控制黑木耳的子实体正常发育的条件，其中温度是最重要的因素。培养室的第一周温度为18℃～25℃。最适温度为18～23℃之间。培养室的温度不宜超过25℃。培养室的空气相对湿度为50%～70%，湿度过高，易生杂菌。光线能诱导菌丝体扭结形成原基。为了控制培养菌丝阶段不形成子实体原基，培养室应保持黑暗或极弱的光照强度。培养室内四周撒一些生石灰，使之呈石破天惊生环境，减少霉菌繁殖的机会。瓶堆积在地面上培养菌丝时，要经常翻动。调换瓶子的位置，在检查杂菌时，一定要轻拿轻放，发现杂菌应及时取出，另放在温度较低的地方继续观察。30天基本就长好了，35天就可以接种栽培袋了。

黑木耳菌种繁殖方式有哪几种？

黑木耳以有性繁殖方式传留后代，但在人工培育菌种时，却分“有性繁殖”（孢子分离）和“无性繁殖”（耳木分离、组织分离）两种方法。

（1）有性繁殖人工分离母种是根据黑木耳子实体成熟时，能够弹射孢子的特性，使子实体上的许多不同性的担孢子着落在培养基上，萌发之后产生不同性的单核菌丝，经异宗结合成为双核工业菌丝，即为菌种。这种按照黑木耳自然繁殖方式进行人工繁殖的方法，称为黑木耳菌种的有性分离或有性繁殖。（2）无性繁殖黑木耳子实体的组织和耳木里面的菌丝，有很强的生命力，具有“无性”繁殖的性能。在自然界里，黑木耳无法进行大量的无性繁殖，只有通过人工分离，才能使无性繁殖获得成功。

无性分离方法是从黑木耳子实体或耳木中人工分离菌丝体，在培养基上使其回复到菌丝发育阶段，变成没有组织分化的菌丝来提取母种。用这种分离方法获得母种，既方便又较有把握，其子实体和菌丝体都是近缘有性世代，遗传基因比较稳定，抗逆力强，母系的优良品质基本上可以继承下来。

黑木耳菌种有哪些

目前黑木耳菌种的常用种型有：木屑种、圆柱形种木种和枝条种三种类型。

（1）木屑菌种

原料易得，制作方便，是目前使用较为普遍的菌种类型。使用木屑菌种接种时比较费工，而且接种穴常成为害虫（如蛀枝虫）的巢穴，其幼虫在穴内啃食菌种和耳木中的菌丝，严重影响接种的成活率。

（2）圆柱形种木菌种

种木有一定形状和规格，需要用木材或枝条进行专门的加工，制作成本较高，但该菌种在接种时比较简单方便，定植成活率高。

（3）枝条种

是用直径1厘米左右的阔叶树枝条，剪成长2厘米，一端呈斜面状。接种时用接种斧（特制）在段木上砍口子后，将枝条种具斜茬一面钉入砍口内，使其贴紧段木的木质部。如接种质量好，定植成活率较高。但菌种生产量大，菌种用的枝条粗细、长短规格不易掌握，这种砍口接种方法对耳木损伤较大，尤其是使用较粗的枝条种，耳木损伤更大，缩短耳木产耳的时间，影响黑木耳产量。因此，现在已较少利用枝条种。

怎样做黑木耳菌种

食 用 菌 制 种 技 术

江苏新沂市康原食用菌研究所 Tel:0516-88939450

(一)母种的制备 用试管制成斜面培养基，并接种原始试管种(保留种，并用于生产的母种即为生产母种，可用于扩接原种。

1．培养基配方 配方一 综合马铃薯培养基 马铃薯 200克 葡萄糖20克 磷酸氢二钾2克 硫酸镁0.5克 维生素B1 10毫克 琼脂20克 水1000毫升 PH值自然

配方二 合成培养基 马铃薯 20克 葡萄糖20克 磷酸二氢钾2克 蛋白胨10克 牛肉膏5克 酵母膏5克 硫酸镁0.8克 水1000毫升 PH值自然

2．培养基制作方法 先将马铃薯洗净去皮切成簿片，称取200克，加水1000毫升，煮沸15—20分钟，用4层纱布过滤，取其滤液并补足水至1000毫升，加入琼脂20克，再加热，琼脂溶化后，再加入其它配方中的药品。 培养基的分装，应在培养凝固前进行（琼脂培养基40℃凝固）一般用漏斗，或分装瓶，下端连接一段软橡皮管，橡皮管下面再连接一水段玻璃管，在橡皮管上安装一个止水弹簧夹，分装时将玻璃管细口插入试管内，但不要碰到管壁，每支试管装入量为度管长度1/4。装好后塞上棉塞，每10支试管扎一捆，棉塞上用塑料纸封扎好，用线绳捆扎起来。

3．灭菌 将分装后的试管扎捆好，放入高压蒸气灭菌锅，在1.1kg/C㎡压力下(锅入温度达121℃)灭菌30分钟,使微生物包括芽孢全部杀死。待压力降到0度时，慢慢放出锅内气体，趁培养基没有凝固时，将试管摆成斜面。

4．接种、培养 通过无菌操作方法将菌种接入试管斜面上，置28℃、3天后将温度降至24℃继续培养，7—15天左右，菌丝长满整个试管斜面，即成(生产)母种。

(二)原种、制备 母种接种到原种培养基上，进行扩大繁殖育种即为原种，原种一般采用广口瓶或袋装。

1．培养基配方 配方一 木屑麸皮培养基 阔树木 78% 麸皮 20% 糖 1% 石膏粉 1% 水 65%

配方二 棉籽壳木屑培养基 棉籽壳 80% 木屑15% 糖 1% 麸皮 5% 过磷酸钙 3% 石膏粉 1%

2．拌料与装袋 选用新鲜无霉变原料，根据生产所需的数量，计算配料总量，将麸皮、石膏粉均匀的混合在培养料里，糖和过磷酸钙溶于水后，按上述干料量加入水，比例为1：1、3拌匀，培养料含水量60%为宜，含水量以手紧握培养料指缝间有水欲滴为宜。堆闷30分钟后，装瓶(袋)。用机械或人工装袋稍加压实，在袋口外套入塑料环，形成象瓶子一样，然后在袋口内塞松紧适宜棉塞、或用牛皮纸包扎好。

3．灭菌 原种灭菌方法有两种，高压灭菌和常压灭菌。高压灭菌又称加压蒸气灭菌，灭菌原理：在高温(121℃以上)、高压(1.1公斤/C㎡)条件下灭菌2~3小时，将芽孢在内的微生物全部杀死。常压灭菌称流通蒸气灭菌，由于灭菌设备、条件和基本因素的不同，温度变动在90~103℃之间，其热力、穿透力不强，在一定温度下维持足够时间达到灭菌目的，通常在100℃下维持10~12小时。

4．接种与培养 不论用接种箱或接种室接种，在接种前，需对接种箱或接种室用0、2%的来苏水或漂白粉进行消毒处理，然后将灭菌过的料瓶(袋)放在箱内，用烟雾剂密闭薰蒸消毒。接种室消毒，一间房需点燃3盒50克规格烟雾剂；接种箱消毒每次仅用重量为4克，一支母种试管可接4—6瓶(袋)原种。将接种后的菌种瓶(袋)放入发菌室培养。培养室温度22~26℃，相对湿度70%以下，发菌期间应保持良好的通风条件。原种从接种到菌丝长满瓶(袋)需30—40天。

(三)栽培种制备 原种进一步扩繁，即为栽培种。栽培种一般采用塑料袋制备，用无棉盖体封口。一瓶原种可接50-60瓶(袋)栽培种。栽培种培养基配方及拌料、装袋、灭菌、接种、发菌管理与原种相同。